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BT-474 BT474人乳腺導管癌細胞 含STR鑑定

更新時間↟▩✘:2019-06-23

簡要描述↟▩✘:

產品名稱↟▩✘:BT-474 [BT474]人乳腺導管癌細胞 含STR鑑定
特點↟▩✘:細胞代數為4代以內☁₪◕✘,細胞耐藥倍數8倍以上;
包裝↟▩✘:內層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書
細胞來源↟▩✘:ATCC✘☁│、sciencell✘☁│、ICLC
貨期↟▩✘:1-2周
售後↟▩✘:收到細胞後12天☁₪◕✘,如發現細胞有質量問題(如汙染☁₪◕✘,死亡☁₪◕✘,快遞運輸等原因)時☁₪◕✘,應出具書面質量問題報告並及時通知銷售人員☁₪◕✘,我們將盡快為您解決·☁₪│!

上海琛藝實業有限公司經過數年的努力發展已迅速成為集產品研發✘☁│、生產✘☁│、經營為一體的專業化生物工程公司◕₪•│。公司新引進細胞上千株☁₪◕✘,其中人的已透過STR鑑定的有幾百株☁₪◕✘,歡迎各位選購◕₪•│。◕₪•│。◕₪•│。◕₪•│。◕₪•│。◕₪•│。

公司產品詳情請點選◕₪•│。◕₪•│。◕₪•│。◕₪•│。◕₪•│。◕₪•│。

產品名稱↟▩✘:BT-474 [BT474]人乳腺導管癌細胞 含STR鑑定

特點↟▩✘:細胞代數為4代以內☁₪◕✘,細胞耐藥倍數8倍以上;
包裝↟▩✘:內層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書
細胞來源↟▩✘:ATCC✘☁│、sciencell✘☁│、ICLC
貨期↟▩✘:1-2周
運輸方式↟▩✘:快遞運輸
售後↟▩✘:收到細胞後12天☁₪◕✘,如發現細胞有質量問題(如汙染☁₪◕✘,死亡☁₪◕✘,快遞運輸等原因)時☁₪◕✘,應出具書面質量問題報告並及時通知銷售人員☁₪◕✘,我們將盡快為您解決·☁₪│!

  • BT-474 [BT474]人乳腺導管癌細胞 含STR鑑定
     
  • 三✘☁│、細胞生長條件↟▩✘:

 

  • 組成↟▩✘:

組份

數目

細胞

 1 T-25

細胞說明書

一份

  • 細胞簡介↟▩✘:

生長特性↟▩✘:

貼壁生長

 

細胞來源↟▩✘:

ATCC/中科院/協和醫院等地引進

培養條件↟▩✘:

培養基↟▩✘:F12K+0.1mg/ml肝素+1%ECGS +10%FBS(推薦德國SERANA S-FBS-SA-015優等胎牛血清)

氣相↟▩✘:空氣95%☁₪◕✘,二氧化碳5%

溫度↟▩✘:37

培養↟▩✘:

  • 貼壁細胞

1.75%酒精噴灑整個瓶消毒☁₪◕✘,將其平躺置於培養箱中進行2-3小時的緩衝☁₪◕✘,.然後置於無菌操作檯☁₪◕✘,開啟瓶口☁₪◕✘,將其中的培養液去掉☁₪◕✘,再往其中加入5-6mL新鮮培養基並置於細胞培養箱中培養☁₪◕✘,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液以及傳代;

2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%☁₪◕✘,需要對其進行傳代☁₪◕✘,*次傳代比例為1:2◕₪•│。

3傳代步驟↟▩✘:將0.25%EDTA胰酶置於37°預熱☁₪◕✘,倒掉培養瓶中的培養基☁₪◕✘,往培養瓶中加入1mlPBS☁₪◕✘,輕晃洗滌後棄去◕₪•│。往瓶中加1ml預熱好的胰酶☁₪◕✘,置於37°孵育消化(*次消化需時常取出置於顯微鏡下觀察☁₪◕✘,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓✘☁│、輕拍瓶壁見細胞脫落為*消化時間☁₪◕✘,記錄*消化時間☁₪◕✘,以便於下次消化)☁₪◕✘,消化好後加入1ml*培養基終止消化◕₪•│。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞☁₪◕✘,使之*脫落☁₪◕✘,然後收集細胞懸液☁₪◕✘,1200rpm離心3min☁₪◕✘,棄上清☁₪◕✘,加入*培養基重懸細胞☁₪◕✘,進行傳代◕₪•│。

 

二✘☁│、懸浮細胞

1.75%酒精噴灑整個瓶消毒☁₪◕✘,然後置於無菌操作檯☁₪◕✘,開啟瓶口☁₪◕✘,輕輕吹打後☁₪◕✘,將其中的細胞懸液轉移到離心管中☁₪◕✘,然後1200rpm離心3min☁₪◕✘,去上清;

2.將離心好的細胞轉移至T-25瓶中☁₪◕✘,並加入5-6mL新鮮培養基☁₪◕✘,然後將其置於細胞培養箱中培養☁₪◕✘,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液(離心後去舊液☁₪◕✘,加入新鮮培養基);

3.顯微鏡觀察細胞數目比較多時☁₪◕✘,對其進行傳代☁₪◕✘,*次傳代比例為1:2(離心後平均分成兩瓶培養)◕₪•│。

 

細胞總數↟▩✘:

1~3*106

傳代週期↟▩✘:

2-3

傳代比例↟▩✘:

1:2~1:4

換液頻率↟▩✘:

2-3

凍存液↟▩✘:

90%FBS+10%DMSO

 

四✘☁│、注意事項↟▩✘:

1 收到細胞後首先觀察T-25瓶是否有損壞✘☁│、漏液✘☁│、渾濁等現象☁₪◕✘,若有上述現象發生請及時和我們聯絡◕₪•│。

2 瓶中運輸的培養液不能重複使用☁₪◕✘,請換新鮮培養液培養

3 對於貼壁細胞☁₪◕✘,若大部分細胞漂浮☁₪◕✘,置於培養箱隔夜觀察☁₪◕✘,大部分漂浮細胞重新貼壁☁₪◕✘,表明細胞活力正常☁₪◕✘,繼續培養☁₪◕✘,剩餘漂浮的細胞可以去掉;若大部分細胞仍然不貼壁☁₪◕✘,將漂浮的細胞離心收集☁₪◕✘,用臺盼藍染色鑑定細胞活力☁₪◕✘,並與本公司銷售人員及時聯絡◕₪•│。

4 建議客戶收到細胞後不同倍鏡各拍幾張細胞的照片☁₪◕✘,記錄細胞狀態☁₪◕✘,如細胞狀態出現問題請於72h與本公司銷售聯絡☁₪◕✘,以便於更好的幫您解決問題☁₪◕✘,超過時間我段☁₪◕✘,本公司則預設細胞狀態良好☁₪◕✘,不免費對後續細胞狀態問題進行售後◕₪•│。

 

做細胞實驗的同學看過來◕₪•│。

選擇上海琛藝生物細胞有3個理由↟▩✘:

1✘☁│、細胞狀態好☁₪◕✘,形態佳☁₪◕✘,易成活☁₪◕✘,是市面上比較好養的細胞之一;

2✘☁│、物流迅速☁₪◕✘,復甦好後發貨☁₪◕✘,次日就能到;

3✘☁│、使用我司推薦的進口品牌血清進行培養實驗☁₪◕✘,效果更佳◕₪•│。

 

 

專業技術人員萬工收藏的細胞培養小技巧:

1. 買細胞要去靠譜的地方買☁₪◕✘,比如 ATCC 或者素冉生物◕₪•│。一般上面會有針對細胞的介紹☁₪◕✘,這樣培養之前可以瞭解細胞正常生長的狀態圖✘☁│、傳代✘☁│、培養基的型別等◕₪•│。

2. 不管是買的細胞☁₪◕✘,還是別人惠贈的細胞☁₪◕✘,剛拿到手趕緊的做兩件事↟▩✘:檢測是否有支原體汙染;迅速擴增凍存☁₪◕✘,凍存細胞復甦後第二天*更換一次培養基◕₪•│。

3. 發現細胞有汙染迅速處理掉☁₪◕✘,特別是當你養了很多種細胞時◕₪•│。細菌汙染✘☁│、真菌汙染很容易發現☁₪◕✘,支原體汙染的話☁₪◕✘,細胞會長的慢☁₪◕✘,可以買個支原體檢測的試劑盒定期檢測一下◕₪•│。

4. 不同細胞生長週期不同◕₪•│。有的生長很快☁₪◕✘,比如說 MDA-MB-231☁₪◕✘,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經足夠了◕₪•│。有的又是特別慢☁₪◕✘,比如 BT474☁₪◕✘,傳代是一分二☁₪◕✘,復甦起始的時候兩週多才能長滿◕₪•│。這就需要要在培養細胞的過程中多多摸索◕₪•│。

5. 對於嬌弱的細胞☁₪◕✘,就得細心呵護◕₪•│。胰酶消化不能過久☁₪◕✘,吹得時候要輕柔☁₪◕✘,離心時候也要注意轉速和時間◕₪•│。每天都要去看一下細胞☁₪◕✘,肉眼觀察培養基狀況✘☁│、顯微鏡下觀察細胞生長狀況◕₪•│。記住☁₪◕✘,是每天◕₪•│。

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