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MHCC97H-GFP 高轉移.
釋出時間▩•₪:2021-09-24   點選次數▩•₪:613次

MHCC97H-GFP人高轉移人肝癌細胞-綠色標記說明書現貨直銷│₪•·,免費快遞送貨上門╃☁·。公司供應各種細胞株│₪•·,細胞系│₪•·,種類齊全│₪•·,現貨│₪•·,質量保證│₪•·,公司所有產品僅供科研使用│₪•·,不得用於醫學診斷╃☁·。

產品名稱

MHCC97H-GFP人高轉移人肝癌細胞

用途

僅用科研

儲存條件

4℃儲存一年;-20℃長期儲存

細胞名稱 
形態特性  上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特徵特性  該細胞屬保藏│₪•·,其特徵特性尚未公開╃☁·。 
培養條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代│₪•·,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用許可權 未定
運輸儲存▩•₪:
採用乾冰儲存運輸╃☁·。收到細胞時│₪•·,若干冰已經*融化│₪•·,請立即將細胞復甦培養;若尚留有乾冰│₪•·,請立即將細胞放入液氮中儲存待用│₪•·,請按條件貯存細胞│₪•·,切不可將細胞置於高溫環境╃☁·。
儲存條件▩•₪:4℃儲存一年;-20℃長期儲存
用途▩•₪:只可用於科研╃☁·。
儲存▩•₪:液氮╃☁·。
運輸▩•₪:乾冰(第二代培養末期液氮凍存)╃☁·。
細胞一般2-3天更換一次培養基│₪•·,這取決於細胞生長的速度╃☁·。許多細胞培養實驗室通常在週一│₪•·,週三│₪•·,週五更換培養基╃☁·。
注意▩•₪:次植入後│₪•·,在6-16小時內更換培養基│₪•·,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞╃☁·。到達客戶手中│₪•·,出現任何問題(人為或者非人為)│₪•·,導致細胞在凍存前死亡│₪•·,我們公司都可以免費再向客戶提供一次╃☁·。對於細胞的真實性│₪•·,支援客戶檢測對應的biomarker│₪•·,(如證明細胞錯誤│₪•·,全額退款╃☁·。)公司針對每株細胞│₪•·,鑑定gene background│₪•·,鑑定完成的細胞可以提供資料│₪•·,用於證明細胞的真實性│₪•·,並且幫助客戶更多的瞭解細胞特性╃☁·。


MHCC97H-GFP人高轉移人肝癌細胞-綠色標記說明書操作步驟▩•₪:
1. 將無菌的蓋玻片置於細胞培養皿中│₪•·,將細胞懸液接種於培養皿中進行細胞爬片│₪•·,待細胞長至80%時取出爬片╃☁·。
2. 用PBS浸洗爬片3次│₪•·,4%的多聚甲醛固定爬片15min│₪•·,再次用PBS浸洗玻片3次│₪•·,每次3min╃☁·。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配製)室溫孵育爬片20min│₪•·,使細胞通透╃☁·。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶│₪•·,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫)│₪•·,PBS沖洗3次│₪•·,每次3min╃☁·。
5. 封閉血清室溫孵育20min│₪•·,PBS沖洗3次│₪•·,每次3min╃☁·。
6. 細胞特異性一抗孵育▩•₪:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗│₪•·,滴加在爬片上│₪•·,於4°C溼盒中孵育一夜│₪•·,PBS沖洗3次│₪•·,每次3min╃☁·。
7. 二抗孵育▩•₪:選與一抗對應的二抗│₪•·,按比例稀釋後滴加在爬片上│₪•·,37°C溼盒中孵育30min│₪•·,PBS沖洗3次│₪•·,每次3min╃☁·。
8. 將爬片周圍水漬吸乾│₪•·,爬片上滴加新鮮配製的DAB顯色液│₪•·,顯微鏡下觀察│₪•·,當出現棕黃色或棕褐色的陽性訊號時用蒸餾水沖洗終止顯色╃☁·。
9. 復染▩•₪:用Harris蘇木素復染30s~1min│₪•·,水洗後用1%的鹽酸酒精分化│₪•·,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍╃☁·。
10. 封片▩•₪:將中性樹膠滴在爬片一側│₪•·,再用蓋玻片蓋上│₪•·,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側│₪•·,以免產生氣泡│₪•·,封好的爬片平放置於通風廚中晾乾╃☁·。
11. 鏡檢觀察╃☁·。分枝桿菌 RNAout50 次

專業技術人員萬工收藏的細胞培養小技巧:

1. 買細胞要去靠譜的地方買│₪•·,比如 ATCC 或者琛藝實業╃☁·。一般上面會有針對細胞的介紹│₪•·,這樣培養之前可以瞭解細胞正常生長的狀態圖·₪▩₪│、傳代·₪▩₪│、培養基的型別等╃☁·。

2. 不管是買的細胞│₪•·,還是別人惠贈的細胞│₪•·,剛拿到手趕緊的做兩件事▩•₪:檢測是否有支原體汙染;迅速擴增凍存│₪•·,凍存細胞復甦後第二天更換一次培養基╃☁·。

3. 發現細胞有汙染迅速處理掉│₪•·,特別是當你養了很多種細胞時╃☁·。細菌汙染·₪▩₪│、真菌汙染很容易發現│₪•·,支原體汙染的話│₪•·,細胞會長的慢│₪•·,可以買個支原體檢測的試劑盒定期檢測一下╃☁·。

4. 不同細胞生長週期不同╃☁·。有的生長很快│₪•·,比如說 MDA-MB-231│₪•·,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經足夠了╃☁·。有的又是特別慢│₪•·,比如 BT474│₪•·,傳代是一分二│₪•·,復甦起始的時候兩週多才能長滿╃☁·。這就需要要在培養細胞的過程中多多摸索╃☁·。

5. 對於嬌弱的細胞│₪•·,就得細心呵護╃☁·。胰酶消化不能過久│₪•·,吹得時候要輕柔│₪•·,離心時候也要注意轉速和時間╃☁·。每天都要去看一下細胞│₪•·,肉眼觀察培養基狀況·₪▩₪│、顯微鏡下觀察細胞生長狀況╃☁·。記住│₪•·,是每天╃☁·。

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